آب HPLC
به آبی گفته میشود که عاری از هرگونه مواد آلی و معدنی بوده و هیچ گونه جذب UV نداشته باشد.برای به حداقل رساندن میزان نویز در تکنیک های کروماتوگرافی، کمپانی های مواد شیمیایی گرید های مختلفی از حلال ها، همچون گرید HPLC یا GC یا LC-MS را تهیه میکنند. برای اینکه بدانید میزان مشخصات و نویز در این گرید خاص از آب HPLC چقدر است، پیشنهاد میشود تا برگه آنالیز این محصول را مطالعه و بررسی کنید، همانطور که در جدول زیر نیز مشخص است میزان مقاومت الکتریکی این محصول 18.2مگا اُهم می باشد.
آبی که برای HPLC استفاده می شود چه ویژگی هایی دارد؟
کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) یک روش معتبر و مورد اعتماد می باشد. که این روزها در بسیاری از آزمایشگاه ها ازین روش استفاده می کنند. استفاده از دستگاه آنالیتیکال آزمایشگاهی High-Performance Liquid Chromatography همچنان مشکلاتی را به همراه دارد. از جمله این مشکلات به هدر رفتن زمان و منابع برای محققان است.
یکی از مشکلاتی که در HPLC بسیار رایج است مربوط به کیفیت حلال/فاز متحرک است. آلاینده ها در حلال می توانند به روش های مختلف بر کار HPLC تاثیر بگذارد. به همین دلیل استفاده از آب در آماده سازی فاز های متحرک و نمونه در آنالیز کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا از اهمیت بالایی برخوردار است.
همه چیز درباره آب گرید HPLC: راهنمای جامع
آب گرید HPLC (High-Performance Liquid Chromatography) یکی از حیاتیترین مواد مصرفی در آزمایشگاههای شیمی و داروسازی است. کیفیت آب مورد استفاده در HPLC به طور مستقیم بر نتایج آنالیز و طول عمر دستگاه تاثیر میگذارد. در این راهنما، به بررسی جامع آب HPLC، ویژگیها، کاربردها، استانداردها و نحوه تهیه آن میپردازیم.
چرا آب HPLC اهمیت دارد؟
در HPLC، آب به عنوان فاز متحرک (به تنهایی یا در ترکیب با حلالهای آلی) برای جداسازی و شناسایی ترکیبات مختلف استفاده میشود. ناخالصیهای موجود در آب میتوانند:
- تداخل در آنالیز: باعث ایجاد پیکهای مزاحم، کاهش حساسیت و دقت نتایج شوند.
- آسیب به ستون: باعث گرفتگی، تخریب فاز ساکن و کاهش طول عمر ستون شوند.
- مشکلات دستگاه: باعث خوردگی، گرفتگی و اختلال در عملکرد پمپ و سایر اجزای دستگاه شوند.
ویژگیهای آب گرید HPLC:
آب HPLC باید دارای ویژگیهای خاصی باشد تا عملکرد بهینه را تضمین کند. این ویژگیها عبارتند از:
- خلوص بالا: فاقد هرگونه یونهای فلزی، ترکیبات آلی، ذرات معلق و میکروارگانیسمها.
- مقاومت الکتریکی بالا: معمولاً بالای 18.2 مگااهم در سانتیمتر (MΩ.cm) در دمای 25 درجه سانتیگراد. این نشاندهنده میزان بسیار کم یونهای موجود در آب است.
- TOC (Total Organic Carbon) پایین: میزان کل کربن آلی (TOC) باید کمتر از 10 ppb (parts per billion) باشد.
- UV Absorbance پایین: جذب نور UV در طول موجهای مورد استفاده در HPLC باید حداقل باشد. معمولاً جذب در 254 نانومتر باید کمتر از 0.005 AU (Absorbance Unit) باشد.
- ذرات معلق: آب HPLC باید فاقد هرگونه ذرات معلق با اندازه بیشتر از 0.2 میکرومتر باشد.
- عدم وجود گازهای محلول: وجود گازهای محلول (مانند اکسیژن) میتواند باعث ایجاد حباب در سیستم و اختلال در پمپ شود.
استانداردهای آب HPLC:
هیچ استاندارد واحد و جهانی برای آب HPLC وجود ندارد، اما استانداردهای مختلفی توسط سازمانها و تولیدکنندگان مختلف ارائه شده است. برخی از این استانداردها عبارتند از:
- ASTM (American Society for Testing and Materials): استاندارد D1193 برای آب ریجنت (Reagent Water) که انواع مختلفی از آب با خلوصهای مختلف را تعریف میکند.
- CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): استانداردهایی برای آب مورد استفاده در آزمایشگاههای بالینی.
- توصیههای تولیدکنندگان دستگاهها و ستونهای HPLC: بسیاری از تولیدکنندگان HPLC و ستونها، مشخصات آب مورد نیاز برای استفاده در دستگاهها و ستونهای خود را مشخص میکنند.
روشهای تهیه آب HPLC:
آب HPLC معمولاً از طریق ترکیبی از روشهای تصفیه تهیه میشود. این روشها عبارتند از:
- پیش تصفیه: حذف ذرات معلق و برخی از مواد آلی با استفاده از فیلترهای اولیه.
- اسمز معکوس (Reverse Osmosis - RO): حذف یونها، مواد آلی بزرگ و میکروارگانیسمها با استفاده از غشاء نیمهتراوا.
- دییونیزاسیون (Deionization - DI): حذف یونهای باقیمانده با استفاده از رزینهای تبادل یونی.
- فیلتراسیون نهایی: حذف ذرات معلق با اندازه 0.2 میکرومتر یا کوچکتر با استفاده از فیلترهای غشایی.
- تصفیه با کربن فعال: حذف مواد آلی با استفاده از کربن فعال.
- اشعه ماوراء بنفش (UV): استریل کردن آب و از بین بردن میکروارگانیسمها و تخریب برخی از مواد آلی.
نکات مهم در مورد آب HPLC:
- نگهداری: آب HPLC باید در ظروف تمیز و غیرفعال (مانند بطریهای شیشهای بوروسیلیکات) نگهداری شود.
- جلوگیری از آلودگی: از تماس آب با هوا و سطوح آلوده خودداری کنید.
- تاریخ انقضا: آب HPLC دارای تاریخ انقضا است و باید قبل از انقضا مصرف شود.
- تست کیفیت: به طور دورهای کیفیت آب HPLC را با استفاده از روشهای مختلف (مانند اندازهگیری مقاومت الکتریکی و TOC) بررسی کنید.
خرید آب HPLC:
آب HPLC به صورت تجاری از شرکتهای تولید کننده مواد شیمیایی آزمایشگاهی قابل تهیه است. هنگام خرید، به موارد زیر توجه کنید:
- برند معتبر: از برندهای معتبر و شناخته شده خرید کنید.
- گواهی آنالیز: گواهی آنالیز (Certificate of Analysis - CoA) را بررسی کنید تا از تطابق آب با مشخصات مورد نظر اطمینان حاصل کنید.
- بستهبندی مناسب: از بستهبندی مناسب و سالم اطمینان حاصل کنید.
نتیجهگیری:
آب HPLC با کیفیت بالا برای دستیابی به نتایج دقیق و قابل اعتماد در HPLC ضروری است. با درک ویژگیها، استانداردها و روشهای تهیه آب HPLC، میتوانید عملکرد دستگاه و کیفیت آنالیز خود را بهینه کنید.